国产肥熟女视频一区二区,ZOOM与人性ZOOM视频,精品AV国产一二三四区,熟女人妻少妇精品视频

網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > 如何正確使用凋亡檢測試劑盒?
產(chǎn)品目錄
如何正確使用凋亡檢測試劑盒?
更新時(shí)間:2022-10-19 點(diǎn)擊量:901
  細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V是一種分子量為35.8 KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V結(jié)合到凋亡細(xì)胞后,在藍(lán)色光的激發(fā)下,發(fā)出綠色熒光,區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細(xì)胞膜,但對凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透,并使細(xì)胞核紅染。將FITC-Annexin V與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開來。
 
  凋亡檢測試劑盒的操作方法:
 
  1.組織經(jīng)福爾馬林固定后會產(chǎn)生廣泛的蛋白質(zhì)交連,因此石蠟組織進(jìn)行凋亡檢測時(shí)要進(jìn)行預(yù)處理。經(jīng)我公司科研人員的長期研究認(rèn)為:TUNEL染色時(shí)蛋白酶K的作用有可能引起內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶的釋放,造成假陽性反應(yīng),同時(shí)過量的蛋白酶K處理可破壞組織的結(jié)構(gòu),用微波技術(shù)替代上述處理可避免上述弊端的出現(xiàn)。
 
  2.微波已被愈來愈多地作為免疫組織化學(xué)和原位雜交的預(yù)處理過程,經(jīng)一定溫度的微波處理可修復(fù)因固定和包埋造成的抗原破壞,打斷氨基酸的肽鍵結(jié)合,促進(jìn)抗原決定簇的暴露,恢復(fù)細(xì)胞膜的空間結(jié)構(gòu),增加穿透效應(yīng),加速組織處理及染色過程。我們在作TUNEL染色前進(jìn)行微波修復(fù),可以達(dá)到蛋白酶K的功效,取得較為理想的效果,背景染色很淺,凋亡細(xì)胞陽性顆粒與背景染色對比非常鮮明。
 
  3.蛋白酶K作用的條件嚴(yán)格,消化度常因組織的不同而在操作中不便掌握。同時(shí)蛋白酶K的價(jià)格昂貴,而微波已作為一種常用儀器用于免疫組織化學(xué)染色中。
 
  (1)切片常規(guī)脫蠟入水
 
  (2)將一燒杯盛200ml的0.01M、pH6.0的檸檬酸緩沖液,加熱至90~95℃,迅速放入切片,使用680W(80%功率)、微波照射1min,加入雙蒸水(20~25℃)80ml作迅速冷卻,將玻片移至PBS(20~25℃)。(3)PBS洗5min×3次。
 
  (4)加20%正常牛血清室溫30min。
 
  (5)將TUNEL反應(yīng)混合液加在切片上,37℃溫育90min(陰性對照片、TUNEL混合液中不加TDT)。
 
  (6)PBS洗5min×3次。
 
  (7)3%H2O2甲醇液室溫阻斷10min。
 
  (8)37℃溫育90min。
 
  (9)加POD轉(zhuǎn)化劑,37℃溫育30min。
 
  (10)PBS洗5min×3次。
 
  (11)DAB/H2O2顯色。
 
  (12)蘇木素淡染,常規(guī)脫水,透明,中性樹膠封固。
 
  結(jié)果:細(xì)胞核呈棕色顆粒者為陽性細(xì)胞,結(jié)合形態(tài)特征,可確立凋亡細(xì)胞。陰性對照片無棕色顆粒。

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

少妇和公翁系列小说| 精品久久久久久无码人妻| 精品久久人人妻人人做精品| 少妇把腿扒开让我添| 一本一道色欲综合网中文字幕| 国产精品久久久久久久久久直播| 日日AV夜夜添久久奶无码| 亚洲久热无码AV中文字幕| 日本做床爱全过程激烈视频| 久久超碰97人人做人人爱| 女人露p毛视频·www| 日本爽爽爽爽爽爽在线观看免| 中文字幕无码精品亚洲资源网久久| 疯狂的肥岳交换130部小短片| 被债主在夫面前人妻被强| 久久久老熟女一区二区三区| 肉伦娇喘连连蜜汁横流| 国产V亚洲V天堂A无码| 亚洲爆乳精品无码一区二区三区| 日本边摸边吃奶边做视频叫床| 入戏太深动漫未删减在线观看| 亚洲国产AV一区二区三区四区| 亚洲国产成人精品无码区二本| 6080YYY午夜理论片中无码| 蜜臀精品无码AV在线播放| 国产AV无码一区二区二三区J| 亚洲同性男男GV在线观看| 中文字幕乱码无码人妻系列蜜桃| 黑人巨大JEEP日本人| 欧洲美女与动交ZOZ0Z| 最近最好的中文字幕2019免费| 免费观看全黄做爰大片| 精品一区二区久久久久久久网站| 久久精品国产亚洲AV无码麻豆| 性做久久久久久久| 国产成人精品亚洲日本在线观看| AV无码专区| 在熟睡夫面前侵犯我在线播放| 调教 SM 重口 H文 HY| 被体育老师抱着C到高潮| 久久免费看少妇高潮A片特无毒|