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Easy-Lowry蛋白定量試劑盒說明書

Easy-Lowry Protein Assay Kit

Easy-Lowry蛋白定量試劑盒

目錄號：K2341

保存：BSA 標(biāo)準(zhǔn)品：2-8℃

       其  它 組  分：室  溫

組分說明

Cat. No.                    K2341

Kit Size                    1000 次/微孔，50 次/試管

試劑 A                        50 ml

試劑 B                        25 ml

BSA 標(biāo)準(zhǔn)品 （2 mg/ml）     2 ml

產(chǎn)品簡介

    Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是一種操作簡便快捷的 Lowry 法蛋白定量試劑盒，可用于多種不同緩沖系統(tǒng)以及各種不同蛋白質(zhì)的定量檢測。Easy-Lowry 蛋白定量試劑盒是在 Improved-Lowry 蛋白定量試劑盒基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化改良的產(chǎn)品，其保留了Improved-Lowry 抵抗干擾能力較強(qiáng)的優(yōu)點，并進(jìn)一步簡化了操作步驟，減少了檢測時間，并且能得到與mproved-Lowry 蛋白定量接近的定量結(jié)果，其檢測范圍為 0-2000 μg/ml。

注意事項

 1.  本產(chǎn)品可以采用分光光度計（試管檢測法）或者酶標(biāo)儀（微孔檢測法）測定蛋白濃度。

 2.  建議每次測定蛋白樣品時，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。

 3.  BSA 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致（可用 1×PBS 或 0.9%生理鹽水稀釋）。

 4.  如待測樣品中含較多的干擾物質(zhì)（具體見附表 1），可采用 Bradford 法蛋白定量試劑盒（YJ0013）或其他蛋白定量

    產(chǎn)品。  

操作步驟

 1.  稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品：用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品。

管號        稀釋液用量（μl）BSA標(biāo)準(zhǔn)品用量（μl）   BSA標(biāo)準(zhǔn)品終濃度（μg/μl）

A                  0                 200                       2

B                 200                200                       1

C                 200          200（從B管中取）               0.5

D                 200          200（從C管中取）              0.25

E                 200          200（從D管中取）              0.125

F                200                 0                         0（空白）

 2.  稀釋試劑 B：將試劑 B 用去離子水稀釋 8 倍混勻待用。

 3.  定量檢測：

 3a.  試管檢測法（蛋白濃度檢測范圍：0-2 μg/μl）

    1）按上表，將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測蛋白樣品（原液或稀釋液）各 200 μl  分別加到作好標(biāo)記的試管中。

    2）向各試管中加 1 ml 試劑 A 迅速振蕩混勻，室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。

    3）向各試管中加入 4 ml 稀釋過的試劑 B，迅速在渦旋儀上混勻，室溫靜置 30 分鐘。

    4）用分光光度計測定 750 nm 下的吸光度值。

    5）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣品中的蛋白濃度。

 3b.  微孔檢測法（蛋白濃度檢測范圍：0-2 μg/μl）

    1）按上表，將稀釋好的 A-F BSA 標(biāo)準(zhǔn)品和待測蛋白樣品（原液或稀釋液）各 5 μl 分別加到作好標(biāo)記的 96 孔板微孔中。

    2）向各微孔中加 50 μl 試劑 A，迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻，室溫準(zhǔn)確放置 10 分鐘。

    3）向每孔中加入 200 μl 稀釋過的試劑 B，迅速用酶標(biāo)儀振蕩混勻，室溫靜置 30 分鐘。

    4）用酶標(biāo)儀測定 750 nm 下的吸光值。

    5）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣品中的蛋白濃度。

注意：

  1）建議以去除背景值后的吸光值讀數(shù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  2）由于操作誤差導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品讀數(shù)嚴(yán)重偏離線性曲線的應(yīng)舍去。

  3）未知樣品濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計算得出,  實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。

  4）如果得到的蛋白濃度不在檢測范圍內(nèi)，請重新稀釋樣品后再次測定。  

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